Westernblot實驗蛋白提取
貼壁細胞總蛋白提?。? 用TBS緩沖液潤洗貼壁細胞2-3次，最后一次盡量吸干殘留液。加入適當體積的細胞總蛋白提取試劑(使用前數分鐘內加入蛋白酶抑制劑)于培養板/瓶內裂解3-5min。期間反復晃動培養板/瓶，使試劑與細胞充分接觸。用細胞刮刀將細胞及試劑刮下，收集到1.5mL離心管中。冰浴30min，期間用移液器反復吹打，確保細胞完全裂解。4℃13000g離心5min，收集上清，即為總蛋白溶液。 懸浮細胞總蛋白提?。? 低速離心收集細胞，加入適當體積的冷卻的PBS緩沖液重懸，2000rpm離心10min，吸除上清。重復以上操作兩次，收集細胞沉淀。加入適當體積的細胞總蛋白提取試劑(使用